Palabras clave
Proteasas
Extracción de ADN
Proteinasa K
Enzimas proteolíticas
tejido animal
Cómo citar
Resumen
La calidad y pureza del ADN son factores críticos para los estudios de biología molecular y genética, ya que afectan la fiabilidad de aplicaciones como la PCR y la secuenciación. La proteinasa K es una proteasa ampliamente utilizada para la digestión de proteínas durante la extracción de ADN, pero su costo y limitada disponibilidad han motivado la búsqueda de alternativas más accesibles. En este estudio se evaluó el uso de un ablandador de carne comercial con bromelina como sustituto de la proteinasa K en la extracción de ADN de tejido de cola de ratón. Se probaron distintas concentraciones del ablandador (0.5 g, 1 g y 2 g por 10 ml de agua) y se compararon con un control positivo con proteinasa K y un control negativo con agua ultrapura. La calidad del ADN se determinó mediante espectrofotometría, evaluando los cocientes A260/A280 y A260/ A230, mientras que la concentración se estimó a partir de la absorbancia a 260 nm. Los resultados mostraron que la concentración y pureza del ADN fueron óptimas en el tratamiento de 1 g de bromelina, logrando un equilibrio adecuado entre rendimiento y reproducibilidad. Aunque la proteinasa K produjo mayores cantidades de ADN, presentó contaminación proteica. Estos hallazgos sugieren que la bromelina es una alternativa económica y viable para laboratorios con recursos limitados, garantizando ADN de calidad suficiente para aplicaciones moleculares.
Citas
Eychner, A. M., Lebo, R. J., & Elkins, K. M. (2015). Comparison of proteases in DNA extraction via quantitative polymerase chain reaction. Analytical Biochemistry, 478, 128–130. https://doi.org/10.1016/j. ab.2014.08.030
Fissore, A., Marengo, M., Santoro, V., Grillo, G., Oliaro-Bosso, S., Cravotto, G., Dal Piaz, F., & Adinolfi, S. (2023). Extraction and characterization of bromelain from pineapple core: A strategy for pineapple waste valorization. Processes, 11(7), 2064. https://doi.org/10.3390/pr11072064
Moreno-Mendoza, M. Á., y Reyes-Romero, M. D. (2025). Estudio de la diversidad genética en cultivos de Indigofera suffruticosa en El Salvador. Revista Mexicana de Ciencias Agrícolas, 15(8), e3557. https:// doi.org/10.29312/remexca.v15i8.3557
Promega. (2025). How do I determine the concentration, yield and purity of a DNA sample? https://www.promega. com/resources/pubhub/enotes/how-do-i-determine-the-concentration-yield-and-purity-of-a-dna-sample/
Rawlings, N. D., Barrett, A. J., Thomas, P. D., Huang, X., Bateman, A., & Finn, R. D. (2018). The MEROPS database of proteolytic enzymes, their substrates and inhibitors in 2017 and a comparison with peptidases in the PANTHER database. Nucleic Acids Research, 46(D1), D624– D632. https://doi.org/10.1093/nar/gkx1134
Rodríguez, M. E., Ortega, J., Gutiérrez-Espeleta, G., Arévalo, J. E., & Rodríguez-Herrera, B. (2020). Genetic diversity and structure of Artibeus jamaicensis in the fragmented landscape of El Salvador. In Conservation genetics in mammals: Integrative research using novel approaches (pp. 249–268). https://doi.org/10.1007/978-3- 030-33334-8_12
Thermo Fisher Scientific. (2025). PCR setup— Six critical components to consider. https://www.thermofisher.com/in/en/ home/life-science/cloning/cloning-learning-center/invitrogen-school-of-molecular-biology/pcr-education/ pcr-reagents-enzymes/pcr-component-considerations.html
Varma, A., Padh, H., & Shrivastava, N. (2007). Plant genomic DNA isolation: An art or a science. Biotechnology Journal, 2(3), 386–392. https://doi.org/10.1002/ biot.200600195
Zaldaña-Orantes, K., Sánchez-Trejo, L., Girón- Galván, L., Rodríguez, M. E., Núñez, G., & Gutiérrez-Espeleta, G. (2021). Genetic diversity of the endangered black-handed spider monkey Ateles geoffroyi (Primates: Atelidae) in a fragmented landscape of El Salvador. Neotropical Primates, 27(1), 1–9. https:// doi.org/10.62015/NP.2021.V27.60
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